Předmět Praktikum z molekulární biologie eukaryot (Bi7312)
Na serveru studentino.cz naleznete nejrůznější studijní materiály: zápisky z přednášek nebo cvičení, vzorové testy, seminární práce, domácí úkoly a další z předmětu Bi7312 - Praktikum z molekulární biologie eukaryot, Přírodovědecká fakulta, Masarykova univerzita (MU).
Top 10 materiálů tohoto předmětu
Materiály tohoto předmětu
| Materiál | Typ | Datum | Počet stažení |
|---|
Další informace
Cíl
Po absolvování tohoto kurzu získají studenti praktické zkušenosti jak provádět základní manipulace s živočišnými a lidskými buňkami in vitro. Budou tak schopní nejen provádět pasážování adherentních a suspenzních buněčných liniía, ale také je geneticky upravovat,analyzovat jejich morfologii, diferenciaci, proliferaci, migraci a apoptózu.
Osnova
1. Pasážováni savčích buněčných linií.2. Přechodná transfekce savčích buněk plazmidem cmvGFP elektroporací a analýza účinnosti transfekce fluorescenční mikroskopií a průtokovou cytometrií.3. Analýza aktivity transkripčního faktoru RAR (přechodná transfekce, test na aktivitu luciferázy a beta-galaktosidázy)4. Studium buněčné morfologie, exprese proteinů a jejich lokalizace v buňce během diferenciace savčích buněk (cytocentrifugace, fixace a barvení buněk, světelná a fluorescenční mikroskopie, frakcionace buněk, elektroforéza proteinů a imunobloting).5. Analýza buněčných markerů apoptózy (značení mrtvých buněk eosinem, analýza jaderné morfologie, štěpení proteinu PARP, externalizace fosfatidylserinu).6. Určení buněčné proliferace a migrace (počítání buněk, značení buněk krystalovou violetí, analýza buněčného cyklu, analýza proliferace a migrace v reálném čase).
Literatura
GREEN, Michael R. a Joseph SAMBROOK. Molecular cloning :a laboratory manual. 4th ed. New York [N.Y.]: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2012. xxxiii, s. ISBN 9781936113422. info
Požadavky
NOW ( Bi7090 Molekulární biologie eukaryot )Kurz vyžaduje znalost základních praktických návyků z oblastimikrobiologie, biochemie a molekulární biologie, jako např.přípravu roztoků a kultivačních půd, sterilní manipulace s tekutinami, inokulace, centrifugace, atd.
Garant
prof. RNDr. Jan Šmarda, CSc.
Vyučující
doc. Mgr. Petr Beneš, Ph.D.Mgr. Lucia Knopfová, Ph.D.Mgr. Jarmila Navrátilová, Ph.D.prof. RNDr. Jan Šmarda, CSc.