Předmět Fluorescenční metody ve vědách o životě - cvičení (C7235)

Na serveru studentino.cz naleznete nejrůznější studijní materiály: zápisky z přednášek nebo cvičení, vzorové testy, seminární práce, domácí úkoly a další z předmětu C7235 - Fluorescenční metody ve vědách o životě - cvičení, Přírodovědecká fakulta, Masarykova univerzita (MU).

Materiál	Typ	Datum	Počet stažení

Cíl

Předmět je zaměřen na získání praktických zkušeností s moderními spektroskopickými metodami analýzy struktury a vzájemné interakce nukleových kyselin a proteinů. Z metodických přístupů je zvláštní důraz kladen na vysoce citlivé fluorimetrické metody a jejich použití v laboratorní praxi. Naplní přednášek jsou principy detekce, způsoby fluorescenčního značení biomakromolekul a jeho použití při analýze funkce a vzájemných interakcí molekul v rámci genomu a proteomu.Součástí výuky je volitelný blok navazujících praktických cvičení, což umožňuje experimentální ověření získaných teoretických poznatků za použití moderního instrumentálního vybavení výzkumných laboratoří. Vyúka je zaměřena na účinné předávání teoretických základů a praktických dovedností při používání specializovaných technik, jejichž využití pro řešení projektů základního i aplikovaného výzkumu se v biologických oborech stává nezbytností v současném interdisciplinárním pojetí biologie.

Osnova

Měření spektrálních charakteristik proteinů a nukleových kyselinPřesné stanovení koncentrace nukleových kyselin a proteinů za použití fluorescence a absorpční spektroskopie (kolorimetrie)Vliv pH a teploty na spektrální vlastnosti fluorescenčních sondMěření vlastní fluorescence BSA, tryptofanu a tyroxinuPříprava fluorescenčně značeného fragmentu DNASpektroskopická charakteristika fluorescenčně značené DNAVizualizace makromolekul při elektroforetické separaciVyužití fluorescenčního rezonančního přenosu energie (FRET) při sledování hybridizace komplementárních řetězců nukleových kyselinSledování zhášení fluorescence po relaxaci vlásenkové struktury fluorescenčně značené DNAReal-time PCR - detekce amplifikace DNA. Fluorescenční mikroskopie (fluorescenční in situ hybridizace)Studium vazby molekul za pomocí anizotropie fluorescence –vazba proteinu a fluorescenčně značené DNA

Literatura

Lakowicz J.R.: Principles of Fluorescence Spectroscopy. Third Edition, Springer + Business Media, New York, 2006

Požadavky

NOW ( C7230 Fluorescenční metody )

Garant

prof. RNDr. Jiří Fajkus, CSc.

Vyučující

doc. Mgr. Ctirad Hofr, Ph.D.Mgr. Vratislav Peška, Ph.D.Patrycja Anna Kłos, Ph.D.Mgr. Ivona NečasováMgr. Eliška JanouškováMgr. Martina Dvořáčková, Ph.D.