Předmět Separační metody B (C8022)

Na serveru studentino.cz naleznete nejrůznější studijní materiály: zápisky z přednášek nebo cvičení, vzorové testy, seminární práce, domácí úkoly a další z předmětu C8022 - Separační metody B, Přírodovědecká fakulta, Masarykova univerzita (MU).

Materiál	Typ	Datum	Počet stažení

Cíl

Separace makromolekul (GPC, light scattering, hydrodynamic chromatography (HDC), frakcionace tokem v poli (FFF)). + Plynová chromatografie (GC), teorie a praxe. + Separace v silovém poli = Elektromigrační metody (kapilární zónová elektroforéza (CZE), izotachoforéza (ITP), micelární elektrokinetická chromatografie (MEKC), gelová kapilární elektroforéza (GCE)) a Hmotnostní spektrometrie + Membránové separace

Osnova

Separace makromolekulMakromolekuly syntetické a biologické. Gyrační poloměr, relativní molekulová hmotnost, polydisperzita. Detekce optická, viskozimetrická. Ultracentrifugace, elektroforéza (GCE). Hmotnostní spektrometrie (+ Matrix Assistant Laser Desorption Ionization, MALDI).Separační metody pro makromolekuly: GPC (Gel permeation chromatography), HDC (Hydrodynamic chromatography), FFF =Frakcionace tokem v poli (Field-Flow Fractionation). Speciální detekční techniky. Rozptyl světla (statický) (Light scattering, LALLS, MALLS). Spojení separačních a detekčních technik.Plynová chromatografiePrincip plynové chromatografie, difúze v plynné fázi, popis distribuce látek mezi fázemi a charakter interakcí látek ve stacionární a v mobilní fázi. Vliv teploty a tlaku plynu na retenční charakteristiky v plynové chromatografii. Základní prvky plynového chromatografu, způsoby zavádění vzorku. Tepelně-vodivostní detekce v plynové chromatografii (katharometr). Plamenový ionizační (FID). Detektor elektronového záchytu (ECD). Fotoionizační detektor, vodivostní detektor. Typy kolon v plynové chromatografii, nosiče stacionární fáze. Kapilární kolony v plynové chromatografii, vliv vnitřního průměru kapiláry a tloušťky filmu stacionární fáze na separaci. Adsorpční plynová chromatografie – používané adsorbenty. Zakotvené a chemicky vázané stacionární fáze v plynové chromatografii – jejich vlastnosti, příprava a volba. Požadavky na kvalitu kolon pro plynovou chromatografii. Plynová chromatografie s programovanou teplotou – účel, vliv teploty na separaci a charakterizace retence. Spojení plynové chromatografie s hmotnostní spektrometrií – výhody a možnosti využití.Elektromigrační metodyTeoretické základy Typy molekul, které lze analyzovat kapilární elektroforézou. Proteiny. Náboj polypeptidů. Elektroforetická titrační křivka. Fyzikální principy kapilární elektroforézy: Elektroforetická pohyblivost. Elektroosmotický tok: elektroosmotická pumpa, modifikátory elektroosmotického toku: tenzidyElektroforetické metody - základní techniky kapilární elektroforézySeparační módy v kapilární elektroforéze: CZE (FSCE), CITP, CGE, MEKC (MECC), CEC, CIEF, diskontinuální elektroforézaElektroforetické metody - instrumentaceZáklady instrumentace - experimentální parametry: kapilára, regulace teploty, detektory (nepřímá detekce), dávkování vzorku, Redukce rozmytí zón v kapilární elektroforéze. Optimalizace: odvod tepla, elektroosmotický tok, on-capillary detekce, molekulární difúze, rozmytí způsobené dávkováním. Hodnocení účinnosti: výhody kapilární elektroforézy. Vyhodnocování dat kapilární elektroforézy: kvalita a kvantita. Detekční limit. Validace metod CE.Elektroforetické metody - aplikace. SDS - Page Electrophoresis, CIE = kapilární iontová elektroforéza, nepřímá detekce, Chirální separace, CE v nevodném prostředí, analýza DNA, Laserem indukovaná fluorescence v kapilární elektroforéze, CE-MS

Literatura

CHURÁČEK, Jaroslav a Pavel JANDERA. Separace látek : kapalinová vysokoúčinná kolonová chromatografie. 1. vyd. Praha: SNTL - Nakladatelství technické literatury, 1981. 140 s. infoCHURÁČEK, Jaroslav. Analytická separace látek. 1. vyd. Praha: Státní nakladatelství technické literatury, 1990. 384 s. ISBN 80-03-00569-8. infoPOPL, Milan a Jaroslav KUBÁT. Separace látek. 3. přeprac. vyd. Praha: Vysoká škola chemicko-technologická, 1986. 171 s. infoVESPALEC, Radim. Chirální separace v kapalném prostředí. 1995. 1 svazek (. info

Požadavky

C7021 Separační metody A C3100 + C4050 Analytická chemie (nebo alespoň C1660)C7021 Separační metody A

Garant

doc. Mgr. Jan Havliš, Dr.

Vyučující

doc. Mgr. Jan Havliš, Dr.