Předmět Část SZZ: Základní experimentální metody (KFY / SZZEM)

Na serveru studentino.cz naleznete nejrůznější studijní materiály: zápisky z přednášek nebo cvičení, vzorové testy, seminární práce, domácí úkoly a další z předmětu KFY / SZZEM - Část SZZ: Základní experimentální metody, Přírodovědecká fakulta, Ostravská univerzita v Ostravě (OU).

Materiál	Typ	Datum	Počet stažení

Obsah

A, Základní experimentální metody (SZZEM)1. Optická soustava světelného mikroskopu a její fyzikální parametry (celkové zvětšení, rozlišovací schopnost, apertura). Köhlerovo schéma.2. Zobrazovací metody ve světelné mikroskopii (metoda světlého a temného pole, metoda fázového kontrastu, metody záznamu obrazu, polarizační a interferenční mikroskopie).3. Praktické základy elektronové mikroskopie - typy interakce elektronů s látkou, základní komponenty EM, princip a použití REM a TEM.4. Principy a teoretické základy absorpční spektroskopie v UV a VIS oblasti - fyzikální podmínky absorpce záření, Franck-Condonův princip, typy elektronových přechodů, vliv prostředí na elektronově vibrační spektra, Lambert-Beerův zákon, příklady anorganických, organických a biologicky významných chromoforů a charakteristika jejich absorpčních spekter.5. Základní schéma optické spektroskopické aparatury - zdroje záření v ultrafialové, viditelné a infračervené oblasti spektra, základní optické materiály pro spektroskopii v UV, VIS a IČ oblasti, způsoby monochromatizace optického záření (optické filtry, hranoly, mřížky) monochromátory, charakteristiky kvality monochromatizace, detektory záření v UV-VIS a IČ oblasti spektra - princip činnosti, spektrální charakteristiky citlivosti.6. Praktické použití UV-VIS absorpční spektroskopie - měření absorpčních spekter pomocí jednopaprskových a dvoupaprskových spektrofotometrů, příprava vzorků pro měření spekter absorpce (resp. propustnosti), kvantifikace látky na základě kalibrační křivky, odchylky od Lambert-Beerova zákona, přesnost a citlivost fotometrických měření - problematika měření koncentrovaných a velmi řídkých vzorků, stanovení koncentrace látek ve směsi obsahující dvě a více absorbujících látek.)7. Experimentace a praktické použití příbuzných spektrofotometrických metod, nefelometrie a turbidimetrie, fotoakustická spektroskopie - reflexní metody, nefelometrie a turbidimetrie, fotoakustická spektroskopie8. Fyzikální principy luminiscence v UV-VIS oblasti. Definice luminscence, základní třídění luminiscence podle druhu excitační energie a doby dohasínání. Jablonského schéma - základní a excitovaný stav polyatomické molekuly, zářivé a nezářivé deexcitační procesy (přechody). Singletní a tripletní excitovaný stav polyatomické molekuly - charakteristika fluorescence (Kashovo pravidlo) a fosforescence. Kvantový výtěžek a doba dohasínání fluorescence.9. Charakteristika fluorescence organických molekul, přirozené fluorofory. Základní charakteristiky fluorescence organických molekul (charakteristika spekter absorpce a fluorescence atomů a organických molekul, zrcadlové symetrie mezi absorpčním a emisním spektrem, vliv polarity prostředí na spektra fluorescence, velikost Stokesova posuvu, sondy polarity prostředí). Základní přirozené fluorofory a jejich aplikace ke studiu biologických systémů (fluorescence aminokyselin, fluorescence nukleotidů, speciální fluoreskující proteiny).10. Experimentální základy fluorescenční spektroskopie, umělé fluorescenční sondy. Schéma luminiscenčního spektrofotometru a funkce jednotlivých komponent. Princip měření emisních a excitačních spekter fluorescence. Základní typy umělých fluoroforů a jejich použití (fluorescenční markery bílkovin, sondy DNA, membránové sondy, fluorescenční indikátory iontů).11. Základní preparativní metody - homogenizace, extrakce, srážení, dialýza, sedimentace, centrifugace - speciální techniky centrifugace.12. Chromatografické metody - obecné principy a klasifikace, princip HPLC, gelové chromatografie, afinitní chromatografie.13. Metody dělení proteinů a nukleových kyselin - obecné principy elektroforézy, PAGE, kapilární elektroforéza, isoelektrická fokusace.

Získané způsobilosti

Používá znalosti z oblasti biofyzikálních experimentálních metod (chromatografické metody, metody světelné a elektronové mikroskopie, základy optické spektroskopie), získaných v rámci profilujících kurzů: KFY/SEPMP, KFY/SEMIP a KFY/OSPP1.

Požadavky

Splnění studijních povinností podle platného studijního a zkušebního řádu.

Garant

doc. RNDr. Vladimír Špunda, CSc.