Předmět Buňky a tkáně in vitro (MB150P23)
Na serveru studentino.cz naleznete nejrůznější studijní materiály: zápisky z přednášek nebo cvičení, vzorové testy, seminární práce, domácí úkoly a další z předmětu MB150P23 - Buňky a tkáně in vitro, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Karlova v Praze (UK).
Top 10 materiálů tohoto předmětu
Materiály tohoto předmětu
| Materiál | Typ | Datum | Počet stažení |
|---|
Další informace
Sylabus
Přednáška : 1. Vybavení: sterilní místnost, box, laminární box, termostat, CO2 termostat. 2. Materiály a jejich vlastnosti: sklo, polyethylen, polypropylen, polystyren, PVC, teflon, fenolformaldehyd, guma, silikon, kovy, buničina, papír. 3. Voda: znečištěniny, destilace, reversní osmóza, deionizace, aktivní uhlí, sterilizace. 4. Kontaminace. 5. Aseptická technika. 6. Mytí a úprava povrchu. 7. Sterilizace: suché a vlhké teplo, ozáření, filtrace, plyny a páry, desinfekce povrchů. 8. Základní podmínky života: osmolarita, pH, pufrování, CO2, teplota. 9. Média a suplementy: balancované solné směsi, média, glutamin, antibiotika, bikarbonát, sérum, bezsérová média. 10. Typy kultur: tkáňové, buněčné, kmenové buňky, linie, růst a evoluce kultury.11. Primární kultury: zdroje tkání, fragmenty a suspense.12. Udržování kultury: subkultura, výměna média, disagregace buněk, klonování, zamražování. 13. Frakcionace a separace buněk. 14. Pozorování a měření: hemocytometr, cell counter, kalibrace, histochemie, pozorování a měření NK (DAPI, Hoechst), viabilita a cytotoxicita (dye exclusion, tetrazoliové soli). Stanovení proteinů (Lowry, Bradfordová, UV), stanovení DNA (DAPI, EtBr), značení živých buněk. 15. Karyologie: příprava roztěrů, barvení, pruhování chromozómů, hybridizace in situ. 16. Transformace buněk: nádorová transformace, kontaktní inhibice, imortalizace kultur, buněčná fúze, transfekce buněk (positivní a negativní selekce, GFP, lipofekce, elektroporace), COS buňky. Praktická cvičení :1. Příprava primární kultury, příprava média.2. Udržování kultury: pasážování, zamražování, rozmražování.3. Klonování v agaru.4. Karyotyp myši.5. Kultivace a fixace buněk na skle, imunofluorescenční barvení cytoskeletu buněk.
Literatura
Freshney, R. Ian: Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique. Wiley-Liss 5rd ed., 2005 (ISBN 0-4714-5329-3).
Požadavky
Zápočet: 100% účast na praktických cvičení; zápočet je podmínkou pro složení zkoušky.Zkouška: ústní, cca 30 min, studentům je umožněna písemná příprava (cca 10 min ).
Garant
RNDr. Tereza Tlapáková, Ph.D.
Vyučující
RNDr. Tereza Tlapáková, Ph.D.