Předmět Separační metody 2 (ACH / SEM2)

Na serveru studentino.cz naleznete nejrůznější studijní materiály: zápisky z přednášek nebo cvičení, vzorové testy, seminární práce, domácí úkoly a další z předmětu ACH / SEM2 - Separační metody 2, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Palackého v Olomouci (UP).

Materiál	Typ	Datum	Počet stažení

Obsah

Úvod, kapalinová chromatografie, vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) - historie, základní pojmy, základní veličiny. Separační principy využívané v kapalinové chromatografii - termodynamická stránka separačního děje.Transport látek kolonou - kinetická stránka separačního děje, porovnání HPLC a GC. Mimokolonové příspěvky v HPLC. Ovlivnění separačního děje v HPLC (rozlišení, selektivita, kapacita, účinnost).Instrumentace v HPLC-vysokotlaká čerpadla, dávkovací zařízení, předkolony, kolony. Detektory, reakční detektory, pomocná zařízení. Záznam a zpracování dat. Spojení HPLC se spektrálními technikami (HPLC-MS, HPLC-FTIR, HPLC-NMR).Tok mobilní fáze kolonou, používané náplně a jejich porovnávání. Chromatografické systémy - popis retence, mechanismus separace, použití. Chromatografie na polárních sorbentech. Chromatografie v systémech s obrácenými fázemi, chromatografie iontových párů. Chromatografie na středně polárních chemicky vázaných fázích. HILIC systémy. Chromatografie v systému kapalina - kapalina.Separace chirálních látek. Ionexy v analytické chemii, chromatografie na měničích iontů. Gelová chromatografie. Afinitní chromatografie. Využití dalších rovnováh v HPLC.Volba chromatografického systému, pracovních podmínek a jejich optimalizace.Mikrokolonová HPLC, preparativní kapalinová chromatografie. Další uspořádání v kolonové kapalinové chromatografii (středotlaká, nízkotlaká). Kapalinová chromatografie v plošném uspořádání (papírová a tenkovrstvá) - materiály, volba podmínek, detekce, instrumentace, použití.Pohyb iontů v elektrickém poli. Pohyblivost iontů. Pohyblivost limitní, aktuální, efektivní. Typy elektromigračních metod. Elektroforetický a elektroosmotický pohyb. Elektrická dvojvrstva, elektrokinetický potenciál. Ovlivnění elektroforetické rychlosti, pohyblivosti a elektroosmózy.Zónová elektroforéza. Rozšiřování zón a potlačení difúze stabilizací zón. Zonová elektroforéza v gelech. Analytická a preparativní elektroforéza v plošném uspořádání. Kapilární zónová elektroforéza. Účinnost a rozlišení. Vliv disipovaného tepla, osmózy, adsorpce, elektromigrační disperze na účinnost. Vliv chemické úpravy kapiláry radiálního napětí, volby základního elektrolytu, pracovní napětí. Instrumentální uspořádání.Separace neutrálních molekul. Micelární kapilární elektroforéza. Speciální ovlivnění efektivních pohyblivostí. Inkluzní komplexy, crown komplexy, afinitní komplexy, separace optických isomerů. Speciální úpravy s proměnným složením základního elektrolytu.Izoelektrická fokusace, charakteristika techniky. Fokusace v gradientu pH, gradientu ligandu. Samozaostřující a koncentrační efekt. Spojení IEF a CZE. Kapilární izotachoforéza, charakteristika techniky. Samozaostřující efekt, izotachoforetická podmínka. Kohlrauschova regulační funkce-podmínka kontinuity. Vedoucí a koncové elektrolyty. Předpověď a výpočet optimálních podmínek separace. Spojení ITP a CZE.On-line prekoncentrační techniky. Aplikace metod na malé molekuly a makromolekuly.

Získané způsobilosti

Definovat hlavní pojmy, představy a metody, navrhovat analyticke postupy a strategie v oblasti separačních metod

Literatura

D. R. Baker, Capillary electrophoresis, Wiley and sons, 1995. F. Fore, L. Křivánková, P. Boček, Capillary zone electrophoresis, Wiley and sons, 1993. Churáček J. a kol.: Analytická separace látek, SNTL Praha, 1990. Poole C., F., Poole S., K.: Chromatography Today, Elsevier, Amsterdam, 1991. Altria K. D.: Capillary Electrophoresis Guidebook, Methods in Molecular Biology 52, Humana Press Totowa, NJ, USA, 1996. Foret F., Křivánková L., Boček P.: Capillary Electrophoresis (Radola B. J., ed.), VCH Verlagsgesellschaft Weinheim, 1993. Heiger D. N.: High Performance Capillary Electrophoresis ? An Introduction, Hewlett-Packard GmbH Waldbronn, 1992. Li S. F. Y.: Capillary Electrophoresis, Journal of Chromatography Library 52, Elsevier Amsterodam, 1993. I. Wilson, C. Poole, M. Cooke: Encyclopedia of separation science. Academic Press, San Diego, London, Boston, New York, Sydney, Tokyo, Toronto 2000. J. P. Landers, Handbook of capillary electrophoresis, CRC Press, 1997. R. E. Ardrey: Liquid Chromatography - Mass Spectrometry: An Introduction. John Wiley & Sons, Chichester 2003. R. Westermeier, Electrophoresis in Practice, A Guide to Methods and Applications of DNA and Protein Separartions, Wiley and sons, 2005.

Požadavky

Během ústní zkoušky student musí prokázat znalosti uvedených témat a témat zahrnutých do předmětu ACH/SEM 1

Garant

prof. RNDr. Karel Lemr, Ph.D.

Vyučující

prof. RNDr. Karel Lemr, Ph.D.