KULTIVACE
Níže je uveden pouze náhled materiálu. Kliknutím na tlačítko 'Stáhnout soubor' stáhnete kompletní formátovaný materiál ve formátu PDF.
STŘEDNÍ ZDRAVOTNICKÁ ŠKOLA A VYŠŠÍ ODBORNÁ ŠKOLA
ZDRAVOTNICKÁ ŽĎÁR NAD SÁZAVOU
DIAGNOSTIKA INFEKČNÍCH CHOROB –
KULTIVACE V LABORATORNÍCH
PODMÍNKÁCH
MGR. IVA COUFALOVÁ
DIAGNOSTIKA INFEKČNÍCH CHOROB –
KULTIVACE V LABORATORNÍCH
PODMÍNKÁCH
Mikroorganismy mají schopnost růstu a
rozmnožování na neživých kultivačních médiích.
V současné době lze kultivovat (uměle
rozmnožovat) v laboratoři téměř všechny druhy
bakterií, kvasinek a plísní i velké části prvoků.
Cílem kultivace je získat čisté bakteriální kultury
a stanovit jejich příslušnost.
KULTIVAČNÍ PŮDY
●
musí splňovat určité parametry:
●
příznivá teplota – 37C
●
Ph 7,2 – 7,4
●
dostatek živin - soli, ionty, vitamíny,
aminokyseliny a růstový faktor
●
vhodné plynné prostření (anaeroby, aeroby)
l
TEKUTÉ KULTIVAČNÍ PŮDY
●
jednoduché i složitější roztoky živin a
růstových faktorů
●
používají se zejména k pomnožení bakterií pro
účely další diagnostiky, patří mezi ně bujón
(masový vývar), inkubuje se 18 – 24 h „přes
noc“
PEVNÉ KULTIVAČNÍ PŮDY
●
krevní agar (želé z beraních erytrocytů)
●
kapka tekuté půdy s pomnoženými mikroby se
nanese „rozočkuje“ pomocí bakteriologické
kličky na tuhou živnou půdu (agar)
●
nejčastěji se uchovávají v Petriho miskách,
bakterie na nich tvoří kolonie (v jedné kolonii
jsou miliony bakteriálních buněk)
●
podle jejich charakteru, vzhledu , barvy i
pachu je možno rozpoznávat druhy narostlých
PEVNÉ KULTIVAČNÍ PŮDY
KULTIVACE VIRŮ
●
množí se na živých půdách
pokusné zvíře - klinický materiál se naočkuje a dle
klinických příznaků se určí diagnóza (myši, kuřata, králíci,
potkani, opice)
kuřecí embrya - (stáří 4 až 10 dnů), vhodné pro některé
viry (chřipka),kuřecí zárodek je sterilní, naočkuje se
suspektním materiálem. Po naočkování se vejce inkubují
v termostatu za 2 až 4 dny se odeberou vzorky z nichž
zjišťujeme pomnožený virus
tkáňové fragmenty- nejčastěji morčecí játra v živném
roztoku –posuzujeme biologickou aktivitu virů podle
změn ke kterým dochází u buněk tkáňové kultury(změna
tvaru, růstu, poškození buněk)
PŘÍPRAVA MIKROSKOPICKÉHO
PREPARÁTU
●
mikroskopické vyšetření je základem
diagnostiky, neboť umožňuje morfologické
rozlišení mikroorganismů
●
má význam zejména u těžkých infekcí, kde je
podkladem pro diagnostiku a cílenou léčbu
antibiotiky
●
preparáty se zhotovují z bakteriálních kultur
vypěstovaných na živných půdách
NATIVNÍ PREPARÁT
používá se pro pozorování tvaru, pohybu a
dělení mikroorganismů, využívá se v
parazitologii, virologii, bakteriologii, mykologii
- připraví se kápnutím suspenze mikroba na
podložní sklíčko (buď kapka tekuté půdy, nebo z
pevné půdy se vytvoří suspenze s F1/1, vzorek
musí obsahovat větší počet mikrobù, aby byli v
nátěru vidět