Protokol - Biologie 8
Níže je uveden pouze náhled materiálu. Kliknutím na tlačítko 'Stáhnout soubor' stáhnete kompletní formátovaný materiál ve formátu PDF.
Analyzované chromozomy se srovnají s obecným diagramem (idiogramem), což je schematicky
znázorněný standardní karyotyp, získaný srovnáváním karyotypů mnoha zdravých lidských buněk.
Sestavením karyotypu můžeme odhalit numerické i některé strukturní chromozomální aberace a
diagnostikovat tak některé genetické poruchy. U člověka byly chromozomální aberace diagnostikovány
jako příčina zhruba u 50 % všech spontánních potratů. Jsou rovněž častou příčinou vrozených
vývojových vad.
Výjimku představují vyvážené přestavby chromozomů, například balancované translokace, při nichž je
množství genetického materiálu v pořádku, jen je abnormálně uspořádaný. Počet a zastoupení genů
zůstávají beze změny, a fenotyp pacienta může být v pořádku. Často ale následkem balancovaných
translokací dochází k nerovnoměrnému rozdělení chromozomů do gamet a tím k poruchám plodnosti
nebo vzniku onemocnění a vývojových vad až u potomků daného pacienta.
Protokol č. 8
Lidský karyotyp a chromozomální aberace
Biologický ústav LF MU
Podzim 2024
2
ÚLOHA 1: POZOROVÁNÍ LIDSKÝCH LYMFOCYTŮ BĚHEM INTERFÁZE A MITÓZY
Materiál a metodika:
Lidské lymfocyty byly izolovány z periferní krve a kultivovány in vitro s přídavkem rostlinného mitogenu
fytohemaglutininu (PHA), což podpoří jejich mitotickou aktivitu. Po získání mnoha mitotických buněk byl
k buňkám přidán kolchicin, který zabraňuje rozestupu sesterských chromatid a způsobí zástavu mitózy.
Buňky byly poté hypotonizovány 0,01M roztokem KCl, fixovány Carnoyovým roztokem (96% ethanol a
95% kyselina octová v poměru 3:1), umístěny na sklíčka, obarveny roztokem Giemsova barviva a
uzavřeny do kanadského balzámu.
Výsledky:
Nakreslete a popište lidské lymfocyty v interfázi a v M-fázi blokované kolchicinem:
Interfáze: M-fáze blokovaná kolchicinem:
ÚLOHA 2: GAMETY PACIENTŮ S NUMERICKÝMI ABERACEMI a) Jaké gamety tvoří žena s Downovým syndromem (karyotyp 47,XX,+21) z hlediska chromozomu
21?
Protokol č. 8
Lidský karyotyp a chromozomální aberace
Biologický ústav LF MU
Podzim 2024
3
b) Může mít tato žena zdravého potomka?
c) S jakou pravděpodobností se této ženě může narodit dítě s Downovým syndromem, pokud otec
je zdravý, karyotyp 46, XY?
ÚLOHA 3: CHROMOZOMOVÉ TRANSLOKACE Schematicky znázorněte chromozomy s Robertsonovskou translokací – fúzí akrocentrických
chromozomů – u pacientů s následujícími karyotypy:
a) 45, XX, t(21;21)
b) 45, XY, t(14; 21)
c) Posuďte, jestli budou jedinci s těmito translokacemi zdraví.
d) Co je hlavním problémem u Robertsonovských translokací?
21
21
14
14
Zdravý jedinec
Zdravý jedinec
21 21
Jedinec s translokací
Jedinec s translokací
Protokol č. 8
Lidský karyotyp a chromozomální aberace
Biologický ústav LF MU
Podzim 2024
4
ÚLOHA 4: GAMETY PACIENTŮ S TRANSLOKACÍ V RÁMCI JEDNOHO PÁRU CHROMOZOMŮ a) Znázorněte, jaké gamety tvoří následující rodiče: matka fenotypově zdravá, karyotyp