Enzymy a nemoci pankreatu

17. Enzymy a nemoci pankreatu

Pankreas

• Slinivka břišní

• Laločnatá žláza s vnější (produkce enzymů – trypsin, lipázy, amylázy) i vnitřní sekrecí (inzulin a glukagon)

• Většina objemu tkáně je určena k výrobě pankreatické šťávy, která je následně odváděna do dvanáctníku

• Pouze 1,5% objemu tvoří buňky, Langerhansovy ostrůvky, které produkují inzulin a glukagon

Nemocní pankreatu

• Nejčastější onemocnění exokrinní složky patří záněty (akutní a chronická pankreatitida)

  • Většinou se nejedná o záněty infekční, ale příčinou bývá reakce na některé toxické látky, poranění, nebo ucpání vývodných cest

• Nádorové onemocnění

  • Příčina není známá, ale vznik je dáván do souvislosti s kouřením, alkoholem a chronickou pankreatitidou.

  • Patří mezi nádorová onemocnění s nejhorší prognózou

• Onemocnění endokrinní části pankreatu vede ke vzniku cukrovky. V případě typu I jde o autoimunitní zánět namířený proti buňkám produkujícím inzulín. V druhém případě (typ II) je vznik onemocnění komplexnější.

Stanovení enzymů

• Spektrofotometricky - stanovení katalytické aktivity E

  • K analyzovanému vzorku se přidá substrát, který se působením enzymu mění na barevný produkt, hodnotí se intenzita zabarvení:

    • Po zastavení reakce - v koncovém bodě "end point"; diskontinuální postup, možnost chyby při nelineárním průběhu reakce

    • Kontinuální, kinetický způsob - absorbance se měří opakovaně v pravidelných intervalech v průběhu celé reakce, vybere se nejlineárnější část

  • Při fotometrickém stanovení se využívá tzv. optický test: je založen na změnách elektronové konfigurace jádra koenzymů NADH a NAD+ při reakci enzymu a substrátu. Využívá odlišné chování koenzymů při různých vlnových délkách (260 a 340nm) výsledná absorbance se měří v UV oblasti (340nm)

AMS - amyláza

• Stanovení v séru a moči

• Sekreční E pankreatu slinných žlaz

• Katalyzuje štěpení škrobu

• Vylučuje se močí

• Izoenzymy - pankreatický a slinný

• Zvýšení v krvi - akutní pankreatitis, onem. Slinných žlaz

• Zvýšení v moči - se zpožděním (6-12 hodin) po vzestupu v krvi

• Izol. Vzestup v krvi - renální insuficience, makroamyláza (vazba IgA a G)

• Makroamyláza - průkaz: gelová filtrace, chromatografie, ELFO. S PEG, ELISA, výpočet FE (cl AMS/cl krea. < 1%) //FE = frakční exkrece

$$FE = \frac{\text{clAMS}}{\text{clkrea}} = \frac{\frac{\text{Uams}*V}{P\ \text{ams}}}{\frac{\text{Ukrea}\ *V}{\text{Pkrea}}} = \frac{U_{\text{AMS}}*P_{\text{krea}}}{P_{\text{AMS}}*U_{\text{krea}}}$$

Stanovení ve stolici

• Test je založen na ILMA (ImmunoLuminoMetricAssay) principu

• Imunochemický průkaz s protilátkou k lidské pankreatické amyláze

LPS - lipáza

• Sekreční E pankreatu

• Štěpí triacylglyceroly na glycerol a mastné kyseliny

• Vzestup u akutní pankreatitis

• Také existuje makroforma. Diagnosticky se ale toto stanovení nepoužívá

• Vzhledem k vysoké specifitě je pro praxi navržen imunologický průkaz lipázy latexovým testem