Enzymy - jaterní skupina

16. Enzymy - jaterní skupina

Játra

• Játra jsou největší exokrinní žlázou v těle

• Mají klíčovou roli v metabolismu sacharidů, tuků i bílkovin

• Zásobní orgán glykogenu, železa, vitamínů a minerálů

• Jsou v nich tvořeny bílkoviny krevní plazmy

Stanovení enzymů

• Spektrofotometricky - stanovení katalytické aktivity E

  • K analyzovanému vzorku se přidá substrát, který se působením enzymu mění na barevný produkt, hodnotí se intenzita zabarvení:

    • Po zastavení reakce - v koncovém bodě "end point"; diskontinuální postup, možnost chyby při nelineárním průběhu reakce

    • Kontinuální, kinetický způsob - absorbance se měří opakovaně v pravidelných intervalech v průběhu celé reakce, vybere se nejlineárnější část

  • Při fotometrickém stanovení se využívá tzv. optický test: je založen na změnách elektronové konfigurace jádra koenzymů NADH a NAD+ při reakci enzymu a substrátu. Využívá odlišné chování koenzymů při různých vlnových délkách (260 a 340nm) výsledná absorbance se měří v UV oblasti (340nm)

Glutamátdehydrogenáza - GMD

• V jaterních mitochondriích

• Katalyzuje reakci při níž se detoxikuje amoniak

GMD

Alfa - ketoglutarát + NADH + H+ + NH4+ <-> glutamát + NAD+ + H2O

• Zvyšuje se u těžkého poškození jater (nekróza)

Umístění E v hepatocytu

• U lehčího poškození hepatocytu (zvýšená propustnost bb. membrány) - v krvi vyšší aktivita cytoplasmatických E (převažuje ALT)

• U těžkého poškození hepatocytu - v krvi i E z nitrobuněčných organel - mitochondrií

AST - aspartátaminotransferáza

• Hepatocyty, kosterní sval, myokard, ery, ledviny, atd.

• 65% v cytoplazmě

• 35% v mitochondriích

• Katalyzuje reakci:

AST

Aspartát + αKG <-> oxalacetát + glutamát

MD

Oxalacetát + NADH + H+ --> malonát + NAD+

• vzestup u závažných onemocněních jater, kosterních svalů, myokardu

• Biol. poločas AST (T1/2) = 12 - 22 h

ALT - alaninaminotransferáza

• V cytoplazmě jaterních bb.

• Katalyzuje reakci:

ALT

Alanin + αKG <-> pyruvát + glutamát

LD

Pyruvát + NADH + H+ --> laktát + NAD+

• Vzestup u onemocnění Jater a žlučových cest

• Biologický poločas ALT (T1/2) = 37 - 57 h

• Pokles aktivity AST a ALT - u deficitu vit B6 (pyridoxin - v kvasnicích, luštěninách), jeho derivát pyridoxalfosfát je koenzymem aminotransferáz.

• Při předávkování (např. B - komplexem) naopak vyšší aktivita AST a ALT

Poměr AST/ALT

Hodnocení tíže poškození jaterní buňky

• AST/ALT < 1

  • Mírné poškození hepatocytů (jen zvýšení permeability buněčné membrány, do krve přestupují cytoplazmatické enzymy)

• AST/ALT > 1

  • Těžké poškození jaterní buňky (nekróza), do krve přestupují i mitochondriální enzymy

GGT - gama - glutamyltransferáza

• Různé hodnoty pro muže a ženy

• Katalyzuje přenos gama - glutamylového zbytku z kyseliny glutamové na vhodný akceptor (peptid, bílkovinu nebo např. glycylglycin), asi za účelem reparace poškození tkáně