Dusíkaté nebílkovinné látky

5. Dusíkaté nebílkovinné látky

• Převážné odpadní látky - Urea, kreatinin, kyselina močová (rovněž antioxidant), amoniak, aminokyseliny (není odpadní produkt)

• Stanovení dusíku DNL podle Kjeldahla

• Nejprve se stanoví celkový dusík ve vzorku

• Poté dusík bílkovin (16 % hmotnosti bílkovin tvoří dusík)

• Celkový - bílkovinný N = N nebílkovinných látek

Močovina

• Konečný produkt metabolismu bílkovin

• Tvoří se v játrech

• Vylučuje se ledvinami procesem

• NH v krvi = 2,5 - 8,3 mmol/l

• Dusík urey tvoří 80% celkového dusíku v těle

• Využívá se k výpočtu dusíkové bilance - zjišťování rozdílů mezi příjmem a výdejem dusíku u daného pacienta za určité časové období (obvykle 24 h)

• Zvýšení (pokles) urey v krvi

  • Onemocnění ledvin

  • Zvýšený přísun bílkovin v potravě

  • Zvýšené odbourávání při sepsi, zhoubných nádorech, krvácení do GIT

  • Dehydratace

  • Nízká koncentrace v krvi souvisí s těžkou poruchou funkce jater, může však být způsobena i preanalytickou chybou

• Indikace k hemodialýze - vhodnost napojení na hemodialýzu

  • Urea/S > 30 mmol/l (3 - 8 mmol/l)

  • Kreatinin/S > 1000 umol/l (norma cca. 100 umol/l)

  • Draslík/S > 7,0 mmol/l (norma 3,6 - 4,8 mmol/l)

• Možnosti stanovení močoviny

  • Chemické

    • S diacetylmonoximem

    • S o - ftaldialdehydem

  • Enzymatické

1/ hydrolýza urey za přítomnosti enzymu ureázy - Močovina je za přítomnosti vody štěpena enzymem ureázou na oxid uhličitý a amoniak. Amoniak se prokazuje Berthelotovou reakcí nebo enzymaticky s GMD. Koncentrace amoniaku je úměrná koncentraci urey ve vzorku.

2/ a) Berthelotova reakce

b) UV test s enzymem glutamátdehydrogenázou

Berthelotova reakce

• Amoniak dává za přítomnosti salicylanu a chlornanu sodného a nitroprusidu sodného zeleně zbarvený produkt vhodný k fotometrickému stanovení.

• Vadí hemolýza.

UV test s enzymem GMD

• 2 alfa - KG kys. + 2 NH4+ + 2NADH -> 2 glutamová kys. + 2NAD+ + 2H2O

• Reakci katalyzujeme enzymem GMD. Hodnotí se úbytek absorbance při přechodu NADH na NAD+ při 340 nm

Kreatinin

• Vzniká ve svalech z kreatinfosfátu a kreatinu

• Kreatin - P + ADP -> kreatinin + ATP

• Anhydrid kreatinu (odtržením molekuly H2O)

• Difuze kreatininu ze sval. Buněk do ETC (extracelulární tekutina - krev)

• Vylučování ledvinami - GF - glomerulární filtrace. (při vysokých koncentracích v krvi dochází k tubulární sekreci

• Koncentrace kreatininu v plazmě závisí na:

  • Stavu ledvin - zvyšuje se při nemocech a selhání ledvin.

  • Objemu svalové hmoty - platí přímá úměra

  • Zátěži svalů - stoupá při svalové námaze, onemocnění a poranění svalů (úraz, operace, zánět, injekce do svalu)

  • Strava (maso) kreatinin téměř neovlivní (na rozdíl od močoviny)

• V plazmě, séru - muži 60 - 100 umol/l

Ženy 50 - 90 umol/l

U dětí a starších osob nalézáme nižší koncentrace kreatininu v krvi než u zdravých dospělých. Ženy mají nižší hodnoty než muži.

• V moči 5,0 - 18 mmol/l