Biologie člověka
Níže je uveden pouze náhled materiálu. Kliknutím na tlačítko 'Stáhnout soubor' stáhnete kompletní formátovaný materiál ve formátu DOCX.
Výskyt:
Výskyt sporadický:
Mutace v somatických buňkách
Výskyt v rodokmenu odpovídá frekvenci onemocnění v populaci
Hereditární výskyt (5-10%) - děděná predisposice
Časnější vznik nádoru, multifokální / bilaterální výskyt, více členů v rodokmenu postiženo shodným typem nádoru
Mendelovský typ dědičnosti – dědičnost autosomálně dominantní (dědí se dispozice)
Mutace zárodečná (recesivní) - (APC, BRCA1, BRCA2, WT, Rb1)
1. mutace zárodečná
2. mutace postnatální (somatická, recesivní)
Buněčné kultury
Primární kultury - odvozené přímo z excise tkáně buněčné linie z různých organizmů, tkání
Explantované kultury
Jednobuněčné suspense
Lze je udržovat jen po omezenou dobu
Během kultivace ztrácejí diferenciační charakteristiky, které mají in vivo
Kontinuální kultury:
Jednobuněčný typ kultury
Jsou udržované pasážováním
Limitovaný počet pasáží (přibližně 30 – 50, replikativní senescence)
Diploidní počet chromosomů, určitý stupeň diferenciace pasážovatelné bez omezení –transformované (nádorové buňky)
Odvozené z nádorových tkání klinických případů
Transformované virovým onkogenem, chemickým kancerogenem…
Závislost na tkáni, ze které byly získané → suspense, monolayer
Suspensní forma – leukemie, lymfomy
Monolayer → růst na podložce; buňky k sobě přiléhají – fibroblasty, solidní nádory (viz monolayer HeLa buněk / karcinom děložního čípku – pasážované více než 50 let)
Kultivace normálních buněk:
Kontaktní inhibice
Omezený počet generací
Typické antigenní determinenty
Aerobní metabolismus
Nutnost růstových faktorů v mediu
Diploidní počet chromosomů
Specifický buněčný tvar
Kultivace nádorových buněk:
Ztráta kontaktní inhibice
Neomezený růst – kultura je nesmrtelná
Změny v povrchových antigenech (MHC, TSTA, fetální antigeny…)
Anaerobní metabolismus
Nízké nároky na růstové faktory v kultivačním mediu
Změněný počet chromosomů
Kultivace:
Sterilní podmínky
Nutriční požadavky
Definované typy medií – dostupné komerčně
Balancovaný roztok anorganických solí - obohacenokarbohydráty, vitaminy, proteiny a peptidy, lipidy amastnými kyselinami, stopové prvky, serum
Ph 7.2–7.4 (7.0-7.7), pufrovaný systém (indikátor bikarbonát):
CO2, atmosféra: 5-10% CO2
Chemicky (HEPES) – nepotřebují CO2 atmosféru
Teplota
Uchovávání – zmrazení (méně než –135°C – tekutý dusík), kryoprotektiva
Cytogenetické vyšetření:
Lymfocyty
Fibroblasty
Buňky kostní dřeně
Trofoblasty
Buňky plodu izolované z amniové tekutiny
Nádorové buňky…
Využití cytogenetiky pro zpřesnění diagnózy:
Kultivace
Zpracování, nakapání na sklíčka
G-pruhování: Giemsa po ovlivnění trypsinem
C- pruhování: centromerické, delší působení trypsinu, výrazně se barví heterochromatinové úseky
R- pruhování: barvení Giemsovým barvivem po zahřátí preparátů