Biologie člověka
Níže je uveden pouze náhled materiálu. Kliknutím na tlačítko 'Stáhnout soubor' stáhnete kompletní formátovaný materiál ve formátu DOCX.
Molekuly DNA mají v podstatě stejný náboj na jednotku hmotnosti, takže se dělí na agarózových nebo polyakrylamidových gelech téměř výhradně na základě své velikosti nebo konformace
Agarózové a polyakrylamidové gely působí jako molekulární síta, která zpomalují průchod velkých molekul více než malých
Agarózové gely jsou vhodnější síta pro velké molekuly (nad několik set nukleotidů), zatímco polyakrylamidové gely jsou lepší pro rozdělování malých molekul DNA
Elektroforéza:
Metoda, která slouží k rozdělení DNA fragmentů o nestejné délce
DNA má celkově slabě negativní náboj a v elektrickém poli putuje ke kladné elektrodě
Rychlost putování je závislá na její celkové délce
Gel (agaróza, polyakrylamid) je ponořen do vhodného pufru mezi elektrody
V gelu u záporné elektrody jsou jamky pro vzorky DNA
Stejnosměrný elektrický proud
Vizualizace fragmentů se provádí např. ethidiumbromidem (interkalačního činidla), které svítí v UV světle
Biologický materiál:
Teoreticky z jakéhokoliv dostupného biologického materiálu (s jádrem)
Polymorfismy lidské DNA využívané v přímé a nepřímé diagnostice:
V 99.9% sekvence DNA se lidé od sebe vzájemně neliší. Ze zbývajícího 0.1% rozdílu tvoří SNP přes 80%. Projekt lidského genomu nyní pokračuje mj. ve formě identifikace miliónů SNP, které jsou shromažďovány ve veřejně přístupných databázích. Možnost typizace mnoha set tisíc SNP v jednom vzorku pomocí DNA čipů by měla usnadnit identifikaci alel, zodpovědných za řadu onemocnění.
DNA čipy:
Moderní metoda analýzy DNA v několika lokusech současně
Genové čipy obsahují velké množství sond, které hybridizují s různými oblastmi genomu
Využití nanotechnologií – manipulace se vzorky probíhá převážně roboticky a vyhodnocení je softwarové
DNA čip - 1.5 x 1.5 cm křemíková nosná destička s mřížkou (v plastové kazetě)
Uměle syntetizované krátké jednovláknové řetězce DNA o známé sekvenci nukleotidů (oligonukleotidové próby); až několik milionů
Analyzovaný vzorek jednořetězcové DNA označení fluorescenčním barvivem
Snímání skenerem, počítačová analýza
Testování aktivity genů (intenzita záření jednotlivých prób po hybridizaci)
Využití:
Genetika, farmakologie, imunologie, mikrobiologie (genové profily virů a bakterií)
Genetická kontrola prenatálního vývoje
Individuální vývoj začíná oplozením
Vývoj jedince pak končí definitivně jeho smrtí
Předchází gametogeneze u obou pohlaví meióza, včetně crossing-overu, rekombinace a náhodné segregace
Gametogeneze – pohlavní buňky z primordiálních zárodečných buněk; Jsou haploidní oproti somatickým
Spermatogeneze:
V semenných kanálcích testes od počátku pohlavní dospělosti do konce života
Spermatogonie 2n primární spermatocyt 2n sekundární spermatocyt 1n spermatida 1n spermie 1n
V jednom ejakulátu 200 miliónů spermií