skripta
Níže je uveden pouze náhled materiálu. Kliknutím na tlačítko 'Stáhnout soubor' stáhnete kompletní formátovaný materiál ve formátu PDF.
který prudkým rozepnutím vyvolá snížení teploty (zákon Gay-Lussacův). U novějších zmrazovacích mikrotomů je k
tomuto efektu využito polovodičových destiček, které působením elektrického proudu se na jedné straně ochlazují,
jejich druhá strana se ohřívá. (Toto teplo je odváděno zpravidla průtokem vody z vodovodu. Výsledný efekt je chlazení
tkáně a případně i nože mikrotomu.)
Krájení v kryostatu je vlastně krájení na mikrotomu, který je celý umístěn v mrazicím boxu.
¶ 4 ·
1.3. Krájení na mikrotomech
Vlastní krájení řezů se provádí na mikrotomech. Jsou to jednoduché přístroje, kde obvykle je nůž veden v rovině proti
bloku a blok je po každém řezu posunován šroubem do výšky. Jindy je nůž pevný a blok je jednak vysunován proti
ostří nože do výšky, jednak se pohybuje proti ostří nože, a tak je zhotoven řez. Na obdobném principu pracují i ně-
které ultramikrotomy, užívané pro zhotovování ultratenkých řezů pro elektronmikroskopické účely. Některé starší
konstrukce ultramikrotomů využívají k vysunování preparátu proti ostří nože roztahování kovového bloku teplem.
Tento blok je mírně ohříván (např. vestavěnou žárovkou, jejíž ohřev je regulován reostatem).
Po ukrojení řezu - z parafínového bloku - je tento řez napnut na kapce vody a přilepen na podložní sklo. Celloidinové
řezy jsou štětečkem přenášeny do 70% alkoholu, zmrazené řezy do nádobky s destilovanou vodou. Ultratenké řezy se
zachycují na elektronmikroskopické síťky. Z bloků pro elektronmikroskopické studium lze zhotovit i řezy pro světel-
nou mikroskopii silné cca 1 µm. Takové řezy jsou přenášeny štětečkem na kapku vody na podložním skle, kde se pone-
chají (za zvýšené teploty) přischnout.
K lepení parafínových řezů na podložní skla se nejčastěji užívá bílek-glycerin, někdy želatina nebo některá syntetická
lepidla. Parafínové řezy po nalepení a usušení musí být odparafínovány a převedeny zpět do vody. Ve většině případů
jsou pak barveny.