Vypracovane-otazky-ke-zkousce

účastnily formace jadérka

• vlastní barvení – ovlivněno různou selektivní denaturací DNA, různou interakcí bílkovin a DNA v těchto úsecích

• kvalita vyšetření závisí na stupni spiralizace pozorovaných chromosomů a tedy na jejich délce a počtu hodnotitelných pruhů = rozlišovací schopnosti vyšetření

• pro zjišťování jemných strukturálních přestaveb (mikrodelecí) – technika HRT

• je nutné hodnotit delší prometafazní chromosomy (cca 850 pruhů)

• větší počet buněk v prometafázi získáme synchronizací buněčného dělení a kratším působením kolchicinu

• synchronizaci můženme navodit plsobením určitých látek (methotrexátu, ethidiumbromidu...) nebo změnou teploty

• tento způsbo přípravy = technika s vysokou rozlišovací schopností (HRT)

• výměny sesterských chromatid (SCE) – metoda, která umožňuje odlišit DNA syntetizovanou před 1.,

2. a dalšími cykly buněčného dělení

- spočívá v inkorporaci bromdeoxyuridinu (BrdU), analogu

thyminu, během S-fáze do nově syntetizované molekuly

DNA, tedy do sesterské chromatidy během replikce

- následně se barví Giemsou a výsledkem je bledě zbarvená

chromatida s BrdU a tmavě zbarvená chromatida původní

- pro testování mutagenních účinků chemických látek a pro

diagnostiku syndromů se zvýšenou lomivostí chromosomů

(Bloomův syndrom)

• FISH – využívá technik molekulární genetiky – specifické sondy hybridizují s denaturovanou DNA –

zvýrazněny navázanými fluorescenčními barvivy

- k rychlé detekci trisomií v prenatální diagnostice, k identifikaci struktury složitějších

přestaveb, v nádorové cytogenetice

30. ODCHYLKY V POČTU CHROMOSOMŮ, PŘÍČINY A KLINICKÉ PROJEVY

• chromosomální abnormality dělíme do 2 základních skupin – numerické

- strukturální

• v obou skupinách změny postihují buď autosomy nebo pohlavní chromosomy

• 3. samostatná skupina – nálezy odlišné chromosomální výbavy ve 2 nebo více buněčných liniích – tzv. mixoploidie (mozaicismus, chimérismus)

NUMERICKÉ CHROMOSOMÁLNÍ ABERACE

• vznikají během meiózy nebo mitózy nerovnoměrných rozdělením chromatid nebo chromosomů do dceřinných buněk => genomové mutace

Aneuploidie

• změny počtu jednotlivých chromosomů v sadě

• ztráta 1 chromosomu v sadě – monosomie

• přebývání 1 nebo více chromosomů – trisomie, tetrasomie....

• nejčastější příčinou vzniku u člověka – nondisjunkce = porucha oddělení homologních chromosomů v I.zracím dělení nebo sesterských chromatid v II.zracím dělení

• v meióze I – vede ke vzniku disomických gamet obsahujících celý pár homologních chromosomů

• v meióze II – tvorba gamet nesoucích 2 stejné kopie 1 chromosomu

• vznikají i gamety nullisomické – neobsahují žádnou kopii chromosomu příslušného páru

• 2/3 aneuploidií u plodů nebo novorozenců jsou maternálního původu – z toho 2/3 vznikají chybou v I.meiotickém dělení

• k nondisjunkci může dojít i v mitóze během časného vývoje zárodku => zastoupení 2 nebo více buněčných linií s různým počtem chromosomů = mozaicismus