Vypracovane-otazky-ke-zkousce

typ defektu příklady postižení enzymů PKU, galaktosemie, deficience adenosindeaminasy receptorů testikulární feminizace, hypercholesterolemie molekulárního transportu CF pankreatu, hypertenze struktury buněk Duchenneova a Beckerova muskulární dystrofie homeostázy antihemofilický globulin, imunoglobuliny regulace růsti a diferenciace determinace pohlaví, inaktivace X chromosomu, tumor supresory mezibuněčné komunikace insulin, růstový hormon, diferenciace pohlaví mitochondrií Leberova atrofie optiku

• Enzymopathie

• celkem popsáno více jak 200 poruch funkce enzymů  fenylketonurie(PKU), hyperfenylalaninemie (HPA) poruchy metabolismu aminokyselin

• PKU = AR dědičná porucha metabolismu fenylalaninu s frekvencí v ČR cca 1 : 6000

  • projevuje se postupným rozvojem duševní zaostalosti, epilepsií a malou pigmentací

  • vysoká hladina fenylalaninu v krvi, manifestující se kyselinou fenylpyrohroznovou v moči

  • je podmíněna mutací genu pro fenylalaninhydroxylasu (PAH) , která katalyzuje přeměnu fenylalaninu na tyrosin

  • fenylalanin je součástí všech bílkovin stravy a není-li pacienty s PKU metabolizován na tyrosin, hromadí se v tělních tekutinách a poškozuje myelinizaci vyvíjejících se nervových vláken

  • část fenylalaninu je fenylalaninaminotransferasou přeměněna na kyselinu fenylpyrohroznovou, která je ve zvýšené míře vylučována močí a dodává ji zápach po myšině; v tělních tekutinách je méně tyrosinu a v organismu i méně produktů jeho metabolismu

  • projevuje se teprve po narození

  • schéma metabolismu fenylalaninu:

bílkoviny potravy

fenylalanin  tyrosin 

  bílkoviny tkání   

kys. fenylpyrohroznová kys. hydroxy- dopamin

• fenylpyrohroznová melanin

•  adrenalin

•  ad.

CO2 + H2O kys. homogentisinová

CO2 + H2O

• v těhotenství je přebytek fenylalaninu plodu odváděn placentou; s prvými vypitými dávkami mléka stoupá hladina fenylalaninu v krvi novorozence

• dietou s velmi nízkým obsahem fenylalaninu a přídavkem tyrosinu lze ovlivnit hladinu fenylalaninu v krvi a zajistit téměř normální psychomotorický vývoj dítěte

• základem úspěšné léčby je včasné stanovení diagnózy  postižené děti se rodí zdravým rodičům  diagnózu lze stanovit jen screeningovým vyšetřením  5.den života se odebírá krev  při podezření na PKU je novorozenec neodkladně hospitalizován

• u žen s PKU je dalším kritickým obdobím života jejich mateřství; v těhotenství placenta mnohonásobně koncentruje fenylalanin v krvi plodu  pokud žena nedodržuje přísnou dietu, hladina fenylalaninu poškodí vývoj plodu a to bez ohledu na jeho genotyp  důsledkem tzv. mateřské PKU jsou mentální retardace, mikrocephalie, srdeční vady

• gen PAH byl pomocí sond mRNA izolovaných z jaterních buněk lokalizován na chromosomu 12q24.1  je dlouhý 90 kb a má 13 exonů

• dosud bylo popsáno více než 170 různých mutací genu PAH  v ČR převládají 4, nejčastější je R408W (60%)  mutace zaměnila kodon 408 ve 12 exonu tak, že místo aRgininu kóduje tryptofan (W) – nejvyšší četnost mutace jev Bělorusku – je proto považována za mutaci slovanskou; další nejvíce zastoupené mutace jsou R158Q (aRginin – glycin (Q)) – mutace častá ve středomoří a R261Q v 5 a 7 exonu

• jiného typu je druhá nejčastější mutace IVS12nt1  postihuje 12.intron a mění sestřihové místo  mutace je nečetnější v Dánsku

• většina osob s PKU jsou složení heterozygoti; závažnosti klinického projevu souvisí na kombinaci mutagenních ala v genomu  př. mutace R408W, IVS12nt1 a R158Q podmiňují klasickou PKU s prakticky nulovou aktivitou PAH, ale mutace R261Q podmiňuje benigní hyperfenylalaninemii (HPA)  aktivita PAH je zčásti zachována a hladina fenylalaninu v krvi je podstatně nižší než u klasické PKU (méně než 1mM); psychický vývoj dětí s HPA je přiměřený i bez diety, ale plod žen s HPA bez diety v těhotenství je poškozen stejně jako plod žen s klasickou PKU

• analýza DNA umožňuje detekci heterozygotů i prenatální vyšetření plodu heterozygotních rodičů  vyšetření plodu se provádí z buněk trofoblastu nebo plodové vody; analýzou DNA lze stanovit presymptomaticky diagnózu PKU, ale i určit závažnost onemocnění a způsob léčby  PKU je jedním z kandidátů na genovou terapii ; gen PAH byl úspěšně přenesen do myších hepatocytů

• u některých novorozenců s vyšší hladinou fenylalaninu v krvi se stav později upraví a dietu nepotřebují = tzv. tranzitorní forma PKU s opožděnou expresí genu PAH v jaterních buňkách

• u 1 – 3 % dětí není léčba dietou účinná  byla prokázána PKU podmíněná mutací genů pro syntézu kofaktoru PAH – tetrahydrobiopterinu (BH1) – pro dihydrobiopterin syntetázu a dihydropteridin reduktasu  komplikovanější léčba